您的位置: 首页 > 院士专题 > 专题 > 详情页

Genotyping Genome‐edited Mutations in Plants Using CRISPR Ribonucleoprotein Complexes

利用CRISPR核糖核蛋白复合物对植物基因组编辑突变进行基因分型

关键词:
来源:
中国科学院遗传与发育生物学研究所
全文链接1:
http://sourcedb.genetics.cas.cn/zw/lw/201805/t20180524_5016638.html
全文链接2:
类型:
学术文献
语种:
英文
原文发布日期:
2018
摘要:
尽管在基因组编辑方面取得了巨大的成就,但是准确检测由序列特异性核酸酶引起的突变仍然是植物尤其是多倍体植物的一个挑战。当突变频率低或需要筛选大量群体时,有效的检测方法尤其重要。本文应用纯化的CRISPR核糖核蛋白复合物切割PCR产物用于六倍体小麦和二倍体水稻的基因组编辑突变检测。结果表明,该突变检测方法比Sanger测序方法更灵敏,比PCR/RE方法更适用于无限制性内切酶位点的检测。我们还证明了这种检测方法在小麦基因组编辑中特别有用,因为目标位点常常被单核苷酸多态性所包围。利用该筛选方法,我们还可以检测纯化的TALEN蛋白诱导的外源游离DNA TAGW2突变。最后,我们表明,部分碱基编辑突变也可以使用高保真SPCAS9变异体或FNCPF1检测。PCR/RNP法成本低,可广泛应用于植物基因组编辑突变的快速检测。
相关推荐

意 见 箱

匿名:登录

个人用户登录

找回密码

第三方账号登录

忘记密码

个人用户注册

必须为有效邮箱
6~16位数字与字母组合
6~16位数字与字母组合
请输入正确的手机号码