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猪脑心肌炎病毒病原学及诊断方法的研究
获奖名称:
科学技术进步奖
获奖区域:
广西自治区
获奖等级:
三等奖
主要完成人:
施开创; 陆文俊; 屈素洁; 郑敏; 莫胜兰; 胡杰; 覃芳芸; 梁媛; 胡丽萍; 杨荣; 粟艳琼; 李军; 何国青; 李常挺; 劳永任
关键词:
方法; 心肌; 猪脑心肌炎; ; 肌炎; 心肌炎; 病毒病原; 诊断方法; 病原学; 诊断; 脑心肌炎病毒病; 脑心肌炎病毒; 病毒病; 病原; 猪脑心肌炎病毒; ; 研究; 病毒; ;
第一完成单位:
广西壮族自治区动物疫病预防控制中心
获奖时间:
2012
项目名称:
联系人:
施开创
联系电话:
0771-3105316;13471031379
电子邮件:
shikaichuang@126.com
邮编:
地址:
广西壮族自治区南宁市友爱北路51号
合作完成单位:
单位电话:
0771-3105316;3100306
传真:
网址:
推荐单位(专家):
摘要:
脑心肌炎病毒(EMCV)在猪主要导致仔猪的脑炎、心肌炎以及母猪的繁殖障碍,对养猪业造成严重危害。我国于2005年首次从流产胎儿及病死仔猪分离到EMCV,国内对猪脑心肌炎的研究起步较晚。加强对该病的研究、防控刻不容缓。 本项目是广西青年基金项目《广西猪脑心肌炎病毒的分子流行病学研究》(桂科青0728047)的核心科技成果。项目利用大肠杆菌原核表达EMCVVP1结构蛋白,以此为包被抗原建立检测EMCV抗体的间接ELISA方法,并应用于广西部分规模猪场EMCV感染的血清学调查;建立检测EMCV的一步法RT-PCR、SYBRGreenIreal-timeRT-PCR和TaqManreal-timeRT-PCR等病原学快速诊断方法,并应用于广西临床病料检测及流行病学调查;分离和鉴定EMCV广西地方株(GXLC株),对分离株基因组进行序列测定以及同源性比较、序列比对及遗传进化分析,并重点分析结构蛋白VP1及非结构蛋白3D基因的分子特征;建立小鼠IL-1、IL-6、TNF-α及iNOS等细胞因子TaqManreal-timeRT-PCR检测方法,以及猪IL-1、IL-6、TNF-α及iNOS等细胞因子多重TaqManreal-timeRT-PCR检测方法,构建细胞因子定量检测的技术平台;将猪源EMCV分离株(GXLC株)分别接种小鼠和仔猪,对其致病性进行研究,并通过检测和分析IL-1、IL-6、TNF-α及iNOS等细胞因子mRNA表达水平与EMCV致病过程的相关性,从分子机制初步探索EMCV的致病机理。项目制定广西地方标准1项,完成硕士论文3篇,发表论文15篇(国家级中文核心期刊14篇、科技核心期刊1篇),培养硕士研究生3名,培训从业人员2000多人次。通过帮助、指导猪场开展严格的综合防控措施,使企业减少经济损失1533万元,取得显著效益。 项目在国内首次建立了EMCV的SYBRGreenIreal-timeRT-PCR和TaqManreal-timeRT-PCR等检测方法,并应用于广西部分规模猪场临床病料检测及流行病学调查,掌握了广西猪脑心肌炎的流行病学特点。在国内首次报道建立猪IL-1、IL-6、TNF-α及iNOS等细胞因子的多重TaqManreal-timeRT-PCR检测技术,对接种猪源EMCV分离株(GXLC株)的仔猪进行了4种细胞因子mRNA表达水平的检测,初步探索EMCV的致病机理。 本项目设计合理,技术路线正确,超额完成合同规定的各项指标,研究成果具有独创性、先进性和实用性,总体达到国内领先水平。
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